abts自由基清除能力的测定原理吸光度越小越好吗_abts自由基清除率测定

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       好久不见，今天我想和大家探讨一下关于“abts自由基清除能力的测定原理吸光度越小越好吗”的话题。如果你对这个领域还不太熟悉，那么这篇文章就是为你准备的，让我们一起来了解一下吧。

1.小麦sod对照管吸光度多少

2.mtt检测hele细胞活力越小结果越好吗

3.在羟自由基清除能力实验中,为什么要探究实验药品最佳用量

4.自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示

5.抗氧化性怎么检验

小麦sod对照管吸光度多少

       560nm。

       在小麦中进行SOD活性检测时。通常会测定SOD对超氧自由基的清除效率或对试剂的还原能力。其中。常用的检测方法是NBT法或PMS法。其吸光度读数一般在560nm左右。

mtt检测hele细胞活力越小结果越好吗

       羟自由基是一种氧化能力很强的自由基。结晶紫法测定OH自由基清除能力基本原理是引言羟自由基是一种氧化能力很强的自由基，容易地氧化各种有机物和无机物，是造成生物组织脂质过氧化、核酸断裂、蛋白质和多糖分解的重要活。H2O发生Fenton反应产生OH，OH容易进攻高电子云密度点，会与结晶紫中具有高电子云密度的基团发生亲电加成反应

在羟自由基清除能力实验中,为什么要探究实验药品最佳用量

       mtt检测hele细胞活力越小结果越好

       MTT主要有两个用途：

       1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；

       2．细胞增殖及细胞活性测定。

       MTT原理：

       检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢（Zā）（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢（Zā），用酶标仪在490nm波长处(英文说明书写的是570nm）测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。

自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示

       机体在代谢过程中产生多种自由基包括超氧阴离子自由基（O-2·）、羟自由基（·OH）及其活性衍生物H2O2等，其中以·OH化学性质最活泼。一定数量的氧自由基可为机体所用，但过多的氧自由基将作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢紊乱引起疾病〔1～4〕。因此，自由基清除剂的合成及寻找成为当前医药研究的主要方向之一，而中药的天然、丰富及低毒更受人们的青睐。目前人们测定自由基清除剂清除羟自由基的方法有很多，其中邻二氮菲- Fe2+氧化法操作简单，设备要求不高，易于推广和应用。本实验对该方法进行了若干改良。

       1 材料与方法

       1.1 试剂维生素C、邻二氮菲、硫酸亚铁铵、过氧化氢、磷酸二氢、无水乙醇和氢氧化钠

       1.2 仪器752N紫外可见分光光度计,DK-600S三用恒温水浴箱. 1.3 方法以维生素C作为自由基清除剂，用邻二氮菲-Fe2+氧化法检测H2O2/Fe2+体系通过Fenton反应产生的·OH。H2O2/Fe2+体系产生的·OH将邻二氮菲-Fe2+氧化为邻二氮菲-Fe3+，使邻二氮菲-Fe2+对536 nm波长的最大吸收减弱，A536明显降低。当反应体系中存在·OH清除剂时，此氧化过程受抑制，A536则降低不明显，并可通过A536值比较·OH清除剂的清除能力〔5〕。对该实验进行三个方面的改良：一是将反应环境由pH 7.4改为pH 4.5的酸性环境；二是将37℃保温时间由60 min改为30 min；三是测定吸光度的波长由536 nm改为510 nm。实验过程中分别在pH 7.4的磷酸缓冲液及pH 4.5乙酸-乙酸钠缓冲液的环境下进行对照实验；在保温5～60 min的时间范围内、536 nm和510 nm波长分别测定吸光度，比较两种pH条件下吸光度的差异。反应中依次加入邻二氮菲、缓冲液、自由基清除剂维生素C、Fe2+及H2O2为加药管；不加维生素C为氧化管；不加维生素C及H2O2为对照管。

       1.4 统计学处理组间采用t检验，数据以±s表示。

       2 结果

       2.1 不同测定波长及不同pH环境下的比较从表1可以看出，邻二氮菲-Fe2+络合物的最大吸收波长为510 nm，而最佳酸碱环境为pH 4.5。表1 不同测定波长及不同pH环境下的比较(略）

       2.2 不同保温时间及不同pH环境下的比较图1显示了pH 7.4时不同保温时间对A510的影响，对照管吸光度于15 min时达高峰，随后缓慢下降；而加药管和氧化管吸光度一开始便呈现急剧下降的趋势。图2显示了pH 4.5时不同保温时间对A510的影响，对照管吸光度于30 min时达高峰，此后处于基本稳定状态；加药管和氧化管吸光度均于30 min后才出现较明显的下降。

       2.3 各管之间吸光度的变化值（ΔA）比较从表2可以看出，随着保温时间的延长，各管之间的ΔA逐渐加大，但pH 4.5时的ΔA加药管-氧化管，在30 min时最大，此后较为稳定。表2 各管之间吸光度的变化值（ΔA）比较（略）

       3 讨论

       实验表明，邻二氮菲-Fe2+络合物在酸性条件下（pH 4.5）比较稳定，有较高的吸光度，并且最大吸收波长为510nm。而保温时间也是实验中的一个重要环节，保温到某一时间时，各管的吸光度较大，同时各管之间的吸光度变化值（ΔA）也较大，有利于自由基清除剂的甑选。从实验中观察到，在pH 4.5的条件下，对照管保温到30 min有最大的吸收峰，加药管也有较大的吸光度，使加药管与氧化管之间ΔA（ΔA加药管-氧化管）达到最大，该值更能说明自由基清除剂的作用强弱，是判断自由基清除剂的重要指标，并且还能反映该方法的灵敏度。而在pH 7.4时，加药管和氧化管一开始便呈现急剧下降的趋势，虽然两管吸光度有所差异，但ΔA加药管-氧化管较pH 4.5时要小得多，不具有说服力，也降低了反应的灵敏度。综上所述，采用邻二氮菲- Fe2+氧化法衡量自由基清除剂的作用时，最佳反应条件为pH 4.5，测定波长为510 nm，37℃保温时间为30 min。

抗氧化性怎么检验

       1)ABTS+.自由基清除能力的测定

       ABTS+.自由基的制备：

       将7mmol／L ABTS储备液和2．45mmol／L高硫酸钾(最终浓度)混合，在室温、避光的条件下静置过夜，形成ABTS”自由基储备液。使用前用O．1mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．4)稀释成工作液，使其在734nnl处的吸光值为O．70-O．02。

       绘制标准曲线：

       配制一系列浓度的Trolox溶液(0—3mmol／L)。20uL不同浓度的Trolox溶液与2mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734nm读取吸光值，以Trolox溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

       ABTS+.自由基清除能力测定：

       20uL消化液与2 mLABTS+.工作液混合，反应6min后在734 nln读取吸光值。ABTS+.自由基清除能力用Trolox等价抗氧化能力表示(TEAC，umol／L)。

       请问下各位大侠，ABTS+.自由基清除能力如何用Trolox等价抗氧化能力表示。最好举个例子，

       FRAP，ABTS以及ORAC法等等；

       FRAP：即"亚铁还原能力实验"，一种在低pH条件下，利用亚铁离子与TPTZ生成蓝紫色复合物来测量样品抗氧化能力的实验，广泛运用于食品与保健品的抗氧化能力分析；

       ABTS：总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用2,2'-azino-bis作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒;

       ORAC：ORAC是氧化自由基吸收能力的缩写，氧化自由基吸收能力又称为抗氧化能力。ORAC分析方法是根据自由基破坏荧光探针，使荧光强度产生变化原理，以维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，使用荧光微孔板分析仪进行分析。荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。

       好了，今天关于“abts自由基清除能力的测定原理吸光度越小越好吗”的探讨就到这里了。希望大家能够对“abts自由基清除能力的测定原理吸光度越小越好吗”有更深入的认识，并且从我的回答中得到一些帮助。