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triton打孔_triton打孔原理
ysladmin 2024-06-21 人已围观
简介triton打孔_triton打孔原理 欢迎大家加入这个triton打孔问题集合的讨论。我将充分利用我的知识和智慧,为每个问题提供深入而细致的回答,希望这能够满
欢迎大家加入这个triton打孔问题集合的讨论。我将充分利用我的知识和智慧,为每个问题提供深入而细致的回答,希望这能够满足大家的好奇心并促进思考。
1.Triton X-100磷酸缓冲液和tris-HCl缓冲液的作用有什么不同?
2.细胞不是被细胞膜包裹吗,进入细胞内不都经过它吗? 为什么蛋白质进入不经过它
3.Tween和TritonX-100分别是什么,又分别有什么作用呢?为什么PBST中有时是加Tween,有时又是加TritonX-100
4.Tween和TritonX-100分别是什么,又分别有什么作用
Triton X-100磷酸缓冲液和tris-HCl缓冲液的作用有什么不同?
在免疫组织化学(厚切片) 和免疫细胞化学中,Triton X-100 被用来做细胞破膜剂/细胞通透剂,即在细胞膜上打孔。这样抗体就能进入内与相关的抗原结合了。Triton X100一般在阻断缓冲液中或稀释缓冲液中使用,基本不用做洗液。使用浓度0.2%。较厚的石蜡切片更应该应用Triton X100,这样可以获得更好的染色背景。
细胞不是被细胞膜包裹吗,进入细胞内不都经过它吗? 为什么蛋白质进入不经过它
1,检查抗体是否过期,保存方法是否正确,稀释比例是否正确。
2,抗体的孵育时间、温度是否正确。
3,洗涤液中是否含有triton-100等破膜物质。
4,洗涤时间是否过长。
5,排除所有人为因素,考虑该细胞可能确实不表达该蛋白。
Tween和TritonX-100分别是什么,又分别有什么作用呢?为什么PBST中有时是加Tween,有时又是加TritonX-100
在生理状态下,细胞膜是细胞的天然屏障,亲水性蛋白质很难直接穿过细胞膜进入细胞内。所以,一般蛋白质进入细胞都是通过胞吞作用完成的,具体方法先是细胞膜内陷包裹住要进入细胞内的蛋白质,然后脱落形成囊泡,完成蛋白质的进入,整个过程蛋白质的直接穿过磷脂双分子层。在免疫组化实验条件下,为了让蛋白质可以直接穿过细胞膜进入细胞内,我们一般用Triton-X100在细胞膜上打孔,改变细胞膜的通透性,这样像蛋白质这样的生物大分子就可以直接穿过细胞膜进入细胞内了。
Tween和TritonX-100分别是什么,又分别有什么作用
tween 和triton 都是做组化或者western时经常用到的试剂。tween可以增加一抗、二抗的抗原特异性,所以PBST中一般洗抗体时是加入tween,BSA试剂稀释抗体的时候也是加入tween;triton是可以增加细胞膜的通透性,简单的说就是“打孔”的作用,做组化之前一般是用PBS中加有triton,可以用来打孔。
tween 和triton 都是做组化或者western时经常用到的试剂.tween可以增加一抗、二抗的抗原特异性,所以PBST中一般洗抗体时是加入tween,BSA试剂稀释抗体的时候也是加入tween;triton是可以增加细胞膜的通透性,简单的说就是“打孔”的作用,做组化之前一般是用PBS中加有triton,可以用来打孔.
好了,今天关于“triton打孔”的话题就到这里了。希望大家能够通过我的讲解对“triton打孔”有更全面、深入的了解,并且能够在今后的生活中更好地运用所学知识。